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走近流式世界

内分泌科流式项目 参考指南

日期:2017/08/20类型:走近流式世界
淋巴细胞亚群 流式检测在临床中的应用

 机体免疫是由机体的免疫器官、免疫细胞及其产物与体液内分泌系统互为协调,维持机体免疫生理平衡的防御性体系。其中免疫细胞是这个体系的中心,淋巴细胞是执行免疫功能的主要细胞,主要分为T、B、NK三大类,其中T细胞主导细胞免疫,表面标记为CD3;B细胞主导体液免疫,表面标记为CD19,分布于B细胞发育的各个阶段;NK细胞称自然杀伤细胞,保护机体的第一道屏障,特异性标志为CD16、CD56。检测各类细胞和细胞亚群的数量、比例及细胞表面标志的变化,可以了解机体所处的免疫功能状态,对疾病的诊断与鉴别、疗效评估、预后判断等十分重要,对机体亚健康状态的诊断及发生相关疾病的评估,也具有重要意义。


淋巴亚群检测项目的临床意义及正常参考值范围

项目名称

检测指标

参考值(%)

绝对计数(个/μL

淋巴亚群(T,B,NK

CD3

CD3CD4

CD3CD8

CD19

CD56

CD4/CD8

CD3+

72±7

711-2351

CD3+ CD4+

43±9

368-1632

CD3+ CD8+

30±9

201-931

CD4/ CD8

1.42±0.89

0.63-3.39

CD3- CD16+56+

14.91±4.87

63-1013

CD3-CD19

11.56±2.54

74-534

活化淋巴细胞免疫表型/幼稚型和记忆型T淋巴细胞

CD3HLA-DR

CD3CD25,CD3CD45RA

CD3CD45RO

CD3+HLA-DR+

3.1±1.3


CD3+CD25+

15.9±3.7


CD3+CD45RO+

3.3±1.55


CD3+CD45RA+

20.51±3.64


Th亚群

IFN-γ/IL-4/CD4/CD3

Th1CD3+CD4+IFN-γ+

18.7±5.03


Th2CD3+CD4+IL-4+

2.99±0.72


中性粒细胞指数

CD64

中性粒CD64/淋巴细胞

CD64平均荧光强度≤1


 

内分泌系统在神经支配、物质代谢和免疫系统的相互配合及调控的基础上释放激素,从而调节人体的物质代谢、脏器功能、生长发育、生殖和衰老等许多生理活动和生命过程。内分泌系统和免疫系统有着极为严密、精确的调节,一方面免疫系统及其产物可以调节内分泌系统的功能,另一方面某些分泌激素和激素受体属于免疫系统的内源性成分,它可以影响和调节免疫功能。对淋巴细胞免疫表型分析联合淋巴亚群分析,能更全面地评价机体的免疫功能。反映多种内分泌疾病的病理过程,对于检测药物疗效,判断疾病的预后等有非常重要的指导意义。


一、      建议检测指标


检测指标:

1T细胞亚群

T细胞:CD3+

辅助诱导型T细胞:CD3+CD4+

抑制杀伤型T细胞:CD3+CD8+

T4/T8CD4/CD8

2B细胞亚群:CD3-CD19+

3NK自然杀伤性细胞:CD3-CD19+

4)活化指标:CD45RO+CD45RA+,CD3+HLA-DR+;CD8+CD38+

     Graves病及桥本氏甲状腺炎中,均有报道HLA-DR+CD25+活化性T细胞比例升高,提示调节性T细胞补偿性扩增,以抑制机体免疫反应。

5Th1Th2细胞:IL-2IFN-γ;IL-4IL-10

免疫细胞在被激活后能够分化成不同的细胞亚群,产生多种多样的细胞因子,如IL-1IL-2IFN等,在内分泌系统的功能活动中发挥相应作用。如一型糖尿病(T1DM)是一种T细胞介导的自身免疫释放的细胞因子在胰岛自身免疫炎症反应及β细胞杀伤中发挥不同的作用,在T1DM患者中,Th1细胞及其细胞因子(IL-4IL-10)比例增高,促进糖尿病的进展,而Th2细胞是主要的效应细胞,其中Th1细胞分泌的IL-2等细胞因子比Th2性细胞因子在病理过程中发挥更重要的作用,临床可以通过用药抑制Th1从而减轻急性炎症引起的甲状腺损伤。

6)中性粒细胞CD64抗原检测

原发性肾上腺皮质功能减退症中:CD64+中性粒细胞数量减少;Cushing综合症患者:CD64+中性粒细胞数量增高。


二、      临床意义


1.辅助诊断

随着科学研究的不断深入,多种内分泌系统疾病的外周血淋巴细胞亚群特征性表现已逐渐被揭示并指导临床。例如,临床研究发现,在儿童Graves病外周血中,CD19+CD4+CD4+CD45RO+以及CD4/CD8的比例均高于正常人群,而CD8+CD4+CD45RA+细胞比例降低,但是这一淋巴细胞异常特征在儿童非毒性结节性甲状腺肿病例中则消失,因此对于淋巴细胞亚群的检测可以辅助临床诊断。

2.检测病程及评价预后

内分泌系统对免疫功能的调节是通过激素来体现的,而许多激素和免疫相关。例如,体内主要的免疫细胞T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞均有皮质激素受体,皮质激素可降低外周血、淋巴节、脾及肠壁中的淋巴细胞,抑制T淋巴细胞功能,大剂量的皮质激素甚至可以直接杀伤淋巴细胞;又如甲状腺激素对于维持免疫系统功能是必不可少的,适量的甲状腺可促进T细胞从胸腺流向外周血,有利于T细胞核B细胞的分化。淋巴细胞群体的检测对于评价相关激素失调引起内分泌系统疾病进程以及判断预后具有重要的指导意义。

3.探索发病机制

多种内分泌系统疾病也属于自身免疫性疾病范畴,其发病与自身免疫反应相关,而淋巴细胞亚群的活动在其疾病进程中发挥重要的作用。目前对内分泌疾病的自身免疫详细机制尚未明瞭。对于不同内分泌疾病的淋巴细胞亚群进行检测和研究有助于进一步揭示疾病的发病机制,进而促进新药的研究开发以及指导临床用药,有一定的科研意义。


各指标在相关疾病中的表现

内分泌疾病

FCM指标(外周边血液)

CD3+

CD3+CD4+

CD3+CD8+

CD19+

CD3-CD16+56+

CD4+/CD8+

Graves


桥本氏甲状腺功能不全




产后甲状腺功能不全

HLA-DR+




一型糖尿病



二型糖尿病



库欣综合症





子宫内膜异位症


Treg


自身免疫性卵巢炎

HLA-DR+