机体最重要的免疫细胞T、B、NK三类淋巴细胞，其中T细胞主导细胞免疫，表面标记为CD3；B细胞主导体液免疫，表面标记为CD19，分布于B细胞发育的各个阶段；NK细胞称自然杀伤细胞，保护机体的第一道屏障，特异性标志为CD16、CD56。
淋巴细胞及其亚群的消长最能反映体内免疫功能的变化，发挥免疫应答，识别自我（诱导免疫耐受），排除异己（免疫应答）的作用，共同维护机体的内环境稳定。机体在正常情况下，各种淋巴细胞亚群（T，B，NK）保持一定的数量和比例，相互作用，免疫应答过强导致自身免疫疾病，抑制过强，导致一些肿瘤细胞逃避机制或病毒慢性感染。
临床上利用流式细胞技术分析淋巴细胞亚群水平，可以帮助检测和评估机体的免疫状态。
淋巴亚群检测项目的临床意义及正常参考值范围 | |||||
项目名称 | 检测指标 | 临床意义 | 参考值（%） | 绝对计数（个/L） | |
淋巴亚群（T，B，NK） | CD3， CD3CD4， CD3CD8， CD19，CD56， CD4/CD8 | CD3+CD4+：辅助/诱导性T细胞，增高提示体内存在细菌病原微生物感染；降低提示体内存在病毒等病原微生物感染。 CD3+CD8+：抑制杀伤性T细胞，增高提示体内存在病毒、胞内菌等病原微生物感染；降低提示严重免疫抑制。CD4/CD8升高提示免疫亢进，下降提示免疫抑制。 CD56+：自然杀伤细胞，固有免疫细胞，是机体抗各类感染的重要因素，减少见于EB病毒、柯萨奇病毒、流感病毒感染等。 CD19+：B细胞，参与体液免疫反应，增高时体内高亲和力抗体也增加，见于各类细菌性感染；减少提示体液免疫功能低下，临床可见反复感染，见于严重病毒感染。 | CD3+ | 72±7 | 711-2351 |
CD3+CD4+ | 43±9 | 368-1632 | |||
CD3+CD8+ | 30±9 | 201-931 | |||
CD4/CD8 | 1.42±0.89 | 0.63-3.39 | |||
CD3-CD16+56+ | 14.91±4.78 | 63-1013 | |||
CD3-CD19 | 11.56±2.54 | 74-534 | |||
活化淋巴细胞免疫表型/幼稚型和记忆型T淋巴细胞 | CD3HLA-DR， CD3CD25， CD3CD45RA， CD3CD45RO | CD3+CD45RA+:初始T淋巴细胞，提示T细胞生成与释放减少；CD3+CD45RO+：记忆T淋巴细胞，在感染性疾病，特别是急性感染性疾病会增高，相反在慢性感染性疾病中反而降低。 HLA-DR：MHC II类分子，起抗原呈递作用，在T、NK细胞为活化标志； CD25：IL-2S受体，表达于活化T细胞，活化T细胞增加，提示机体免疫应答活动增强，见于病原微生物感染等免疫功能被激发的情况，活化T细胞检测在器官移植后免疫功能检测和术后感染检测中有重要意义。 | CD3+HLA-DR+ | 3.1±1.3 | |
CD3+CD25+ | 15.9±3.7 | ||||
CD3+CD45RO+ | 3.3±1.55 | ||||
CD3+CD45RA+ | 20.51±3.64 | ||||
Th亚群 | IFN-γ/IL-4/CD4/CD3 | Th1增多见于临床各种炎症性疾病，如病原微生物感染，尤其是细胞内感染，Th2增高见于临床各种过敏性疾病、体液免疫性疾病、细胞外感染 | Th1 （CD3+CD4+IFN-γ+） | 18.7±5.03 | |
Th2 （CD3+CD4+IL-4+） | 2.99±0.72 | ||||
一、 建议检测指标及临床意义
1、淋巴亚群检测指标
1）T细胞亚群
总T细胞：CD3+
辅助诱导型T细胞：CD3+CD4+
抑制杀伤型T细胞：CD3+CD8+
T4/T8：CD4/CD8
细胞毒T细胞：CD8+CD28+
抑制性T细胞：CD3+CD28-
活化的T细胞：CD3+HLA-DR+
免疫调节性T细胞（Treg）：CD4+CD25HiCD127Low
自然杀伤性T细胞（NKT）：CD3+CD16+56+
Th1/Th2比值：Th1 CD4+IFN-γ+；Th2 CD4+IL-4+
2）NK自然杀伤性细胞：CD56+
临床意义
1. 检测肿瘤进展和评估疾病预后
肿瘤的进展和预后取决于肿瘤细胞的侵润性与机体免疫功能的变化。因此连续监测机体的免疫状态是对疾病的监控和预后的重要指标。患者免疫功能越低下，病理越晚，预后越差。
当病程进展、转移或者复发时机体的T细胞、B细胞、NK细胞整体减少；CD4和CD4/CD8下降，CD8增高，并以抑制性T细胞（TS）CD8+CD28-为主。而外周血、淋巴结和肿瘤局部的代表免疫耐受的CD4+CD25+Treg细胞增加，Th1/Th2比值下降，此比值代表抗肿瘤能力，Th1细胞分泌IL-2，IFN-γ以及TNF-β，在抗肿瘤免疫中发挥重要作用。
2. 肿瘤治疗效果监控
肿瘤患者的治疗效果明显影响外周血淋巴亚群分布。临床可通过术后前后连续监测免疫功能来瞭解术后患者的恢复情况。有效手术或放化疗，免疫治疗会提升淋巴亚群比例，尤其CD4/CD8比值趋向正常健康组，促进Th1/Th2比值上升，向Th1漂移。
3. 各指标的变化趋势
临床意义 | FCM指标（外周血） | ||||||||||||
CD3+ | CD3+ CD4+ | CD3+ CD8+ | CD3- CD16+ 56+ | CD3- CD19+ | CD8+ CD28+ | CD8+ CD28- | CD4+ CD25+ CD127- | CD4+/ CD8+ | CD4+ CD45RO+ | CD3+ HLADR+ | Th1 | Th2 | |
肿瘤进展 | ↓ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | ↑ | ↓ | ↓ | ↓ | ↑ | |
预后不良 | ↓ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | ↓ | ↓ | ↓ | |||||
复发转移 | ↑ | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | ↑ | |||||
有效手术 | ↑ | ↑ | ↓ | ↑ | ↑ | ↓ | ↓ | ↑ | ↑ | ↓ | ↓ | ||
有效化疗 | ↑ | ↑ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | ↓ | ↓ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | |
放疗 | ↓ | ↓ | ↑ | ↓ | |||||||||
免疫治疗 | ↑ | ↑ | ↓ | ↑ | ↑ | ||||||||
生活质量差 | ↓ | ↓ | ↑ | ↓ | ↑ | ↑ | ↓ | ↓ | |||||
2、细胞周期及DNA倍体分析检测指标
1）DNA倍体
2）S期细胞比率
3、各指标分析诊断肿瘤细胞的标准
1）出现非整倍体细胞峰，DI＞1.1或DI＜0.9；
2）无明显的异倍体，但S期＞15%；
3）无明显的异倍体，但G0/1的CV＞10%，S期在10%-15%；
4）S+G2/M＞20%。
临床意义
1. 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断
良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞（DI＞1），而恶性肿瘤则伴有相当数量的非整倍体出现，相当部分癌前病变也有非整倍体的出现。所以非整倍体细胞是判断肿瘤恶变的一个重要标志。
2. 有利于判断肿瘤的预后
对于非整倍体的肿瘤，其恶性程度高，复发率高，转移率高，预后差；近二倍体和二倍体肿瘤，则预后较好。
4、细胞治疗检测指标
1）DC1（髓系DC）/DC2（淋巴系DC）
DC1（髓系DC）：CD（14+16）-CD85K+CD33+
DC2（淋巴系DC）：CD（14+16）-CD85K+CD123+
2）DC表面标志：CD80，CD86，CD83，CD1a
3）CIK细胞：CD3+CD56+
临床意义
CIK细胞与DC细胞共培养可使CIK细胞获得更快的增值速率和更强的抗肿瘤活性，利用DC-CIK免疫治疗联合放化疗及手术治疗，有助于减少恶性肿瘤的转移与复发，进一步提高临床疗效。
