妇产科流式项目 参考指南

机体免疫是由机体的免疫器官、免疫细胞及其产物与体液内分泌系统互为协调，维持机体免疫生理平衡的防御性体系。其中免疫细胞是这个体系的中心，淋巴细胞是执行免疫功能的主要细胞，主要分为T、B、NK三大类，其中T细胞主导细胞免疫，表面标记为CD3；B细胞主导体液免疫，表面标记为CD19，分布于B细胞发育的各个阶段；NK细胞称自然杀伤细胞，保护机体的第一道屏障，特异性标志为CD16、CD56。

检测各类细胞和细胞亚群的数量、比例及细胞表面标志的变化，可以了解机体所处的免疫功能状态，对疾病的诊断与鉴别、疗效评估、预后判断等十分重要，对机体亚健康状态的诊断及发生相关疾病的评估，也具有重要意义。

一、      建议检测指标

1）T淋巴细胞亚群

总T细胞：CD3+

辅助诱导型T细胞：CD3+CD4+

抑制杀伤型T细胞：CD3+CD8+

T4/T8：CD4/CD8

2）B细胞亚群：CD19+

3）NK自然杀伤性细胞：CD3+CD56+

4）活化指标：CD45RO+CD45RA+；CD3+HLA-DR+；CD8+CD38+

5）Th1和Th2细胞：CD4+IFN-γ+，CD4+IL-4+

6）中性粒细胞CD64抗原检测

正常：中性粒细胞CD64指数（中性粒细胞CD64平均荧光强度/淋巴细胞CD64平均荧光强度）≤1；

感染或组织损伤：中性粒细胞CD64指数＞1。

一、      临床意义

1、不孕、自然流产、习惯性自然流产与不良妊娠

自然流产原因不明，与遗传、解剖、内分泌及免疫异常有关。

不孕和反复性流产的女性外周血中NK细胞水平常会升高，而NK细胞可被失败妊娠或退化的受精卵激活，增多时会将胎儿细胞误认为非正常细胞，从而杀伤胎儿细胞，当这类细胞比率大于18%时往往预示着较差的妊娠结局。

习惯性自然流产与免疫系统异常有关。辅助性T淋巴细胞分化成两个亚群，Th1和Th2，分泌不同的细胞因子。Th1细胞分泌IL-2和IFN-γ，通过细胞介导的免疫反应，清除胞内抗原；Th2细胞分泌IL-4、5、10，参与体液免疫和过敏反应。正常怀孕的妇女细胞因子“偏向”Th2。

不良妊娠结局可能是和感染有密切关系的。病原体可包括弓形虫、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒、细菌、螺旋体、支原体、衣原体等。可以通过淋巴细胞亚群检验进行诊断。

2、孕程检测和治疗预后判断

T淋巴细胞和B淋巴细胞

--分泌期子宫内膜，CD8+T细胞比例降低，CD4+/CD8+比值增高。B细胞比例显著增高

--习惯性自然流产这经治疗后，检测CD8+T细胞和B细胞数目和CD4/CD8比值，恢复正常后，随后成功怀孕

--可作为治疗的预测指标

--试剂：淋巴细胞亚群分析试剂，根据仪器配置选择

NK细胞

--在怀孕并发的子痫和流产患者，发现外周边血液NK细胞数目增多，子宫内膜浸润的NK细胞增多，并且表达活化标志

--NK细胞的毒性可作为可能发生自燃流产的预测指标

--检测标志：CD3/CD56/CD69

B细胞

--体液免疫异常

--检测标志：CD19/CD5

胞内细胞因子

--正常怀孕的妇女，Th2细胞因子占优势；习惯性自然流产的妇女，Th1细胞因子占优势。在不孕的妇女，TNF-α分泌增多。IL-10分泌与正常妇女比减少。

-TNF-α可能通过诱导细胞凋亡的方式，抑制滋养层的生长

--IL-10通过抑制IFN-  BTNF-  BIL-1的产生，选择性抑制Th1介导的细胞免疫。习惯性自然流产免疫治疗后判断

--流式交叉配型实验，阳性结果怀孕率高。比微量淋巴细胞毒实验灵敏度高，出结果快。可作为常规检测。

--母亲的血清与父亲的T淋巴细胞反应，在流式细胞仪上检测。

--经免疫治疗后，母体细胞因子分泌发生改变。